PRRSV感染Marc-145细胞的病毒形态发生学、细胞超微结构变化及细胞凋亡的研究

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以猪繁殖与呼吸综合征病毒四川分离株(PRRSV-SC1)感染体外培养的Marc-145细胞为模型,通过透射电镜、光镜、DNA Ladder、ELISA、TUNEL等技术方法对PRRSV的病毒形态发生学和宿主细胞超微结构变化及感染细胞凋亡的动态变化规律进行研究。观察结果显示,病毒粒子呈球形,有囊膜,大小约45-65nm,内含直径大小约25-30nm的核衣壳。病毒感染细胞后以细胞内吞方式进入细胞,在胞浆内复制,装配好的病毒以出芽或细胞外分泌释放到细胞外。感染细胞超微结构变化主要表现为:细胞胞浆空泡增多,内质网扩张,线粒体的嵴肿胀、脱落,最后空泡化,细胞表面的微绒毛脱落,出现典型的细胞凋亡特征,并观察到凋亡小体,最后整个细胞裂解,破碎。DNA Ladder、ELISA和TUNEL检测结果显示,在感染后的前24h,感染组凋亡细胞与对照组相比差异不显著(P>0.05),在感染后48h、72h、96h、120h感染组凋亡细胞与对照组相比差异极显著(P<0.01)。在感染后72h细胞凋亡达到高峰,随后细胞凋亡水平又有所下降。在感染后144h,DNA Ladder无法检测到凋亡,ELISA法检测到低于正常组细胞的凋亡水平,TUNEL法检测到极少量的凋亡细胞。三种生化指标检测方法所检测到细胞凋亡及其动态变化规律基本一致。
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