【摘 要】
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目的:观察鹿角胶对大鼠原代成骨细胞增殖和分化的影响。方法:采用酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞并采用组织化学和免疫组化染色进行细胞鉴定。把生长状态良好的第3代成骨
【机 构】
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山东省中医药研究院中药药理研究室;
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目的:观察鹿角胶对大鼠原代成骨细胞增殖和分化的影响。方法:采用酶消化法分离培养大鼠颅骨成骨细胞并采用组织化学和免疫组化染色进行细胞鉴定。把生长状态良好的第3代成骨细胞,分为4组,对照组用正常DMEM-LG培养基培养;实验组用含有低、中、高剂量鹿角胶的DMEM-LG培养基培养。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法观察鹿角胶对原代成骨细胞的增殖的影响;碱性磷酸酶(ALP)比活性检测观察鹿角胶对成骨细胞分化的影响;ELISA法检测鹿角胶对成骨细胞骨钙素的影响;western blot检测鹿角胶对成骨细胞BMP-2蛋白表达的影响。结果:原代成骨细胞细胞贴壁且呈梭形,经钙化结节染色呈强阳性,经Ⅰ型胶原、骨桥蛋白免疫组化染色呈阳性,证实获得的细胞为成骨细胞;中剂量组的鹿角胶能够显著促进成骨细胞的增殖和分化;实验组的碱性磷酸酶活性和骨钙素明显强于对照组(P<0.01),其中中剂量组的作用最明显;鹿角胶剂量的逐渐增加能够显著促进成骨细胞内BMP-2蛋白的表达升高。结论:鹿角胶具有促进大鼠原代成骨细胞增殖和分化的作用,对成骨细胞的增殖及碱性磷酸酶、骨钙素、BMP2的合成具有促进作用。
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