东北虎群体细胞库技术平台的建立

来源 :第十五次全国动物遗传育种学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuhy07
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野生动物资源是大自然赋予人类宝贵的财富,但是近100年来由于野生动物栖息的自然资源和生态系统遭到严重破坏,物种灭绝的速度超过自然灭绝速度的100倍,因此收集和保存我国野生动物基因资源的行动己迫在眉睫。东北虎为国家一级保护动物,己被世界野生动物基金会列为全球十大濒危动物之首,因此,构建其体细胞库,有利于种质资源的保存和利用。本试验所需34只东北虎的耳缘组织和血液样品由黑龙江东北虎林园提供,采用贴壁培养法和冷冻生物学技术分别构建了东北虎群体体细胞库,并对其中细胞系进行了细胞形态、活率、生长曲线、微生物、同工酶、核型和外源基因在培养细胞中的表达及细胞融合与细胞凋亡等生物学特性研究。
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孤雌生殖是指无雄性配子的任何作用,由雌性配子产生个体的繁殖。孤雌生殖的关键是提高卵母细胞的激活率,而卵子在自然条件下的激活是由精子穿入刺激引起的,即由于精子的进入启动MⅡ期卵母细胞继续发育,通过人工模拟自然条件下卵母细胞的自然激活机理创造更多更好的激活方法,从而进一步提高卵母细胞的孤雌激活率,一直是孤雌生殖研究的重点内容,具有重要的研究价值。现如今,我国与国外相比,对猪卵母细胞的体外成熟培养、孤雌
CLKs(CDC-2-like kinase homologs)激酶家族存在于包括果蝇、小鼠、人类等许多生物中,是进化上保守的双特异性激酶。而CLK1(CDC-2-like kinase 1)是CLKs激酶家族的一员,能够在C端酪氨酸和丝氨酸或苏氨酸残基上自我磷酸化而使自身活化,而N端区域对其有负调控作用,它不改变底物和酶的亲和力,而是从构象上抑制了CLK1激酶的催化活性。CLK1有13个外显子,
细胞增殖与细胞死亡是细胞生命活动中同等重要的特征,是生物繁育的基础。细胞在进行分裂之前要有物质准备,物质准备和细胞分裂是一个连续过程,这一过程称为细胞增殖。就免疫器官中的免疫细胞而言,凋亡的细胞需要通过细胞增殖来补充。本试验通过断喙应激对雏鸡免疫器官细胞增殖指数、细胞凋亡率影响的研究,旨在探讨断喙应激对雏鸡免疫器官的损伤性反应及持续时间,为减少生产中的断喙应激提供一定的理论依据。
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肌内脂肪是一个重要的经济性状,是指肌肉块中的脂肪组织但这并不包括肌肉块周围的脂肪。这些脂肪细胞究竟来源于哪,并不是很清楚。一般认为肌内脂肪细胞来源于前体脂肪细胞。但在人、鼠、羊、猪等的肌卫星细胞在一定条件均能向脂肪细胞方向转变。肌卫星细胞是否可作为肌内脂肪细胞的一个来源,并不是很清楚。本研究为采取链酶蛋白酶消化法分离猪肌卫星细胞,利用PPARy的诱导剂Rosiglitaze处理猪的肌卫星细胞,分析
没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)可抑制3T3-L1成熟脂肪细胞中脂质堆积和脂肪酸生物合成中的限速酶乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的活性,日粮中添加EGCG使小鼠脂肪组织中脂肪酸合成酶(FAS)和ACCT的mRNA水平显著降低。但是,就EGCG对脂解作用的影响现在还未见报道。本实验用EGCG处理原代培养猪的脂肪细胞,检测其对脂肪分解过程中关键酶激素敏感脂酶(HSL)和甘油三酯水解酶(TGH)转录水平表
为了研究Fas在牛卵泡发育过程中的生物学功能,本试验将克隆的牛Fas基因定向插入真核表达载体pAcGFP-N1中,构建融合蛋白哺乳动物细胞表达载体,并在分离、建系的牛卵泡颗粒细胞中进行表达,以期为进一步揭示Fas在牛卵母细胞发育中的调控作用提供技术支持。
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间充质干细胞(M3Cs)是来源于发育早期中胚层的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞,广泛存在于全身多种组织中,可在体外培养扩增,并能在特定条件下分化为成骨细胞、脂肪细胞等,在细胞替代治疗及组织工程方面有极大的应用价值。本实验使用两种方法从家禽胚胎中分离出脐带间充质干细胞,其中组织块贴壁法获得的细胞没有经过胶原酶的消化处理,细胞活力与胶原酶消化法所得细胞活力相比较强。脐带间充质干细胞成功