【摘 要】
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根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF2基因序列,利用Primer5.0软件设计合成了一对特异性引物,经RT-PCRAK河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为771bp的片段,并将扩增的
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会
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根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF2基因序列,利用Primer5.0软件设计合成了一对特异性引物,经RT-PCRAK河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为771bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF2的阳性克隆pTG19-T-GP2。将此基因亚克隆到原核表达载gpGEX-6p-1,经筛选获得了阳性重组质粒pGEX-GP2,进而在IPTG的诱导下成功表达,获得了大小约为45kD的融合蛋白,纯化后经Western blot测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。从而进一步研究PRRSV次要结构蛋白GP2的免疫特性和功能奠定了基础。
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