【摘 要】
：
翼状螺旋/叉头状转录因子超家族(winged helix/forkhead transcription factor,fox)是一类转录调节核蛋白.本实验室前期已报道fox家族基因foxh1在尼罗罗非鱼性腺中的表达
【机 构】
：
西南大学生命科学学院,淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,重庆市水产科学重点实验室,重庆400715
论文部分内容阅读
翼状螺旋/叉头状转录因子超家族(winged helix/forkhead transcription factor,fox)是一类转录调节核蛋白.本实验室前期已报道fox家族基因foxh1在尼罗罗非鱼性腺中的表达呈明显的性别二态性.原位杂交结果显示,foxh1表达于卵巢卵母细胞的细胞质.这暗示foxh1对罗非鱼卵巢生殖细胞的发育具有重要作用.本研究通过CRISRP/Cas9靶向基因敲除技术成功在遗传XX全雌鱼敲除foxh1.性腺组织学观察表明,敲除foxh1的XX鱼在1月龄卵母细胞数目与对照雌鱼相比明显减少,在10月龄时卵母细胞的发育受到影响,只有大量原始卵母细胞,而无各时相卵母细胞及卵子,体细胞大量增生,对照组中存在各级卵母细胞和大量卵子.免疫组化结果显示,敲除foxh1的XX鱼卵巢体细胞雄性化,在1月龄时即检测到精巢特异基因Dmrt1和雄激素合成关键酶Cyp11b2的表达,10月龄时二者仍持续表达,且雌激素合成酶Cyp19a1a和雄激素合成关键酶Cyp11b2共表达于foxh1敲除雌鱼增生的卵巢间质细胞.Real-time PCR与Western blotting结果表明,foxh1敲除XX雌鱼与对照XX雌鱼相比,Cyp19a1a/Cyp19a1a的表达降低,而Dmrt1/Dmrt1和Cyp11b2/Cyp11b2的表达升高.血清中雌、雄激素水平测定结果显示,与对照XX雌鱼相比,fo,xh1敲除XX雌鱼E2水平降低,而11-KT水平升高.此外,免疫组化与Western blotting结果表明,与对照组雌鱼相比,RA(视黄酸)合成酶Aldh1a2与一、二时相卵母细胞marker 42SP50的表达明显下调,而原始生殖细胞marker Eef1a1b的表达明显上调.以上实验结果表明,Foxh1对罗非鱼生殖细胞的减数分裂起始与维持具有重要作用,并且可能在性类固醇激素的合成调节中发挥作用.
其他文献
转座子是真核生物基因组的重要组成部分.其中自主型的逆转座子如LTR和LINE元件在各类群物种的分子系统发育、遗传多样性等方面的研究中得到了广泛的应用.为了揭示德国小
美洲大蠊(Periplaneta americana)为蜚蠊目蜚蠊科大蠊属物种,是传统的中药,对组织修复有着很好的疗效.本研究对美洲大蠊3-4龄若虫、7-8龄若虫、刚羽化成虫、雌成虫和雄成
达氏鲟(Acipenser dabryanus)主要分布在长江中上游干流及金沙江下游,为我国特有鱼类,具有重要的物种价值,被列为国家Ⅰ级保护的水生野生动物.由于过度捕捞、水体污染、
鲈鲤(Percocypris pingi)隶属鲤形目、鲤科、鲃亚科、鲈鲤属,主要分布于长江上游(金沙江)及其支流,为我国特有鱼类,具有重要经济价值.由于过度捕捞、水体污染、水电建设
哺乳类的大量研究表明,胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)除对多种神经元具有营养与保护作用外,在维持体外培养的神经干细胞
胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)(Bleeker)为长江流域鱼类资源保护区中重要的人工增殖放流种类,但随着放流量的逐渐增大,在其苗种生产中部分人工繁育子一代,甚至子二代的
肌肉生长抑制素(myostatin)是肌肉生长的重要抑制因子。硬骨鱼类经过其特有全基因组复制事件(fish specific genome duplication)产生了两个旁系同源基因,myostatin1和my
长期以来,岩羊属(Pseudois)被认为包含了两个物种：岩羊(P.nayaur)和矮岩羊(P.schaeferi),但我们近些年的研究已表明矮岩羊只是岩羊中一群形态特异的群体,因此岩羊则是岩羊
microRNA是小的非编码RNA,是许多生理过程的重要调控者.近年来许多研究表明microRNA在动物免疫、疾病发生和衰老中具有重要调解作用.大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)属于
以天山自然遗产地喀拉峻亚高山草甸为研究对象，于2014年7月底-8月初，研究了现有不同放牧利用方式，禁牧、限牧和放牧，对草地植物群落的影响，同时对土壤有机质、全量和速效养分