【摘 要】
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目的:探讨低浓度bFGFT和酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)基因转染对干细胞(Neural stem cells,NSCs)分化的影响.方法:从胚胎16bWistar大鼠前脑室管膜下周围区分离、鉴定、增殖NSCs;将TH基因与缺陷性逆转录病毒载体N2A构建成表达质粒后,用电穿孔方法将TH-N2A转入PA317包装细胞内,收集PA317包装产生的逆转录病毒颗粒,感染休外
【机 构】
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重庆市第三军医大学附属新桥医院神经外科(重庆)
【出 处】
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2001年老年性痴呆和帕金森国际学术会议
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目的:探讨低浓度bFGFT和酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)基因转染对干细胞(Neural stem cells,NSCs)分化的影响.方法:从胚胎16bWistar大鼠前脑室管膜下周围区分离、鉴定、增殖NSCs;将TH基因与缺陷性逆转录病毒载体N2A构建成表达质粒后,用电穿孔方法将TH-N2A转入PA317包装细胞内,收集PA317包装产生的逆转录病毒颗粒,感染休外培养的NSCs,并以G418筛选,获得抗G418的NSCs克隆;分别以0.4/ml bFGF和5﹪FBS诱导转染后NSCs分化,比较不同诱导方式及TH基因转染对NSCs分化的影响,同时在分化细胞内检测TH基因的表达.结果:无论是是否传染TH基因,神经元及神经胶质细胞的分化数量都不发生改.0.4ng/mlbFGF诱导可以使95﹪以上的NSCs分化为神经元,而5﹪FBS诱导则大多分化为神经胶质细胞,神经元的分化比例下降到5﹪以下.神经干细胞转染TH基因后能够高效、稳定地表达TH.结论:0.4ng/mlbFGF可以促使NSCs分化为神经元;TH基因转染后不影响NSCs的分化潜能,并能在神经干细胞的子代细胞中有效表达.
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