模拟微重力诱导小鼠成骨细胞微丝变化对碱性磷酸酶及骨钙蛋白的影响

来源 :广东省医学会第九次骨质疏松学学术会议暨湛江市医学会骨质疏松学专业委员会第一次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seanyx
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目的:研究模拟微重力诱导小鼠成骨细胞微丝结构改变对碱性磷(alkaline phosphatase,ALP)及骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)的影响,探讨失重导致骨质疏松的机制.方法:本研究以已建株的小鼠成骨样细胞株(MC3T3-E1)作为对象,以回转器模拟微重力效应.实验将细胞分为4组:模拟微重力组、0.5μg/ml细胞松弛素B组、模拟微重力+0.5μg/ml细胞松弛素B组及正常重力组(对照组).培养48h后,利用异硫氰酸荧光素鬼笔环肽(fluoresceine isothiocyanatephalloidin,FITC_phalloidin)进行免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察各组细胞微丝的变化;同时用ALP试剂检测各组细胞培养液内ALP的酶活性,采用ELISA法检测各组细胞裂解液中OCN的表达最.结果:除正常重力组外,其余各组细胞微丝结构都出现了不同程度的解聚,张力纤维减少,失去方向性,以模拟微重力+0.5 μg/ml细胞松弛素B组改变最为明显.和正常重力组比较,其余各组ALP的酶活性和OCN的表达量均成下降趋势(P<0.01),且模拟微重力+0.5μg/ml细胞松弛素B组与模拟微重力组和0.5 μg/ml细胞松弛素B组这两组之间的差别都有统汁学意义(P<0.05).结论:微重力影响成骨细胞ALP的酶活性及OCN的表达可能与微重力诱导细胞骨架微丝解聚相关。
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