论文部分内容阅读
由于随着细胞群体倍增(PD)次数的增加，细胞增殖能力下降，为界定猪胎儿成纤维细胞衰老代数提供了理论依据，据此本研究采用舍血清DMEM完全培养基进行猪胎儿成纤维细胞的体外培养.分别对第3、15、26和34代猪胎儿成纤维细胞采用MTT法检测细胞的增殖能力，对第14、25、30和34代猪胎儿成纤维细胞采用β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老程度，并对第23和34代猪胎儿成纤维细胞采用DAPI染色法鉴别细胞袁老程度.结果如下：采用β-半乳糖苷酶染色法观察发现未发现任何细胞变成深蓝色，表明细胞还未衰老;采用DAPI染色法发现细胞核在第23和34代均呈现弥散均匀的蓝色荧光，几乎无不规则的荧光小碎片出现，表明细胞还未衰老.本研究结果对于继续鉴定猪胎儿成纤维细胞年轻和衰老细胞的群体倍增教(PDL)划分提供了直接实验证据，并为后续采用差异显示、抑制消减杂交及实时荧光定量等方法进行母猪寿限相关候选基因的筛选奠定了基础.