骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的体外构建研究

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目的:探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的构建及基本生物学特性。方法:体外构建大鼠绝经后骨质疏松症(PMOP)模型并分离培养骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(O-r BMSCs),以O-rBMSCs为种子细胞构建细胞膜片,通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜(SEM)及透射电镜(TEM)对细胞膜片进行形态学检测,免疫组织化学染色检测细胞外基质相关蛋白的表达情况。结果:成功构建大鼠PMOP模型,体外分离培养的O-rBMSCs具有多向分化潜能。采用富含维生素C的培养基连续培养10d左右即可获得白色膜样结构,该细胞膜片具有较好的弹性,显微镜下可见细胞复层生长,HE染色及扫描电镜观察发现O-rBMSC膜片由多层细胞及丰富的细胞外基质组成。透射电镜下可观察到多层间通过桥粒方式连接。免疫组织化学染色示O-rBMSC膜片高表达Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)。结论:O-rBMSCs体外采用富含维生素C的培养基连续培养可构建细胞膜片,该细胞膜片富含细胞外基质,有望应用于骨质疏松机体的组织再生。
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