【摘 要】
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目的:了解维生素D受体(VDR)特异性siRNA转染对鼠主动脉内皮细胞(EC)增生、凋亡、一氧化氮合酶及载脂蛋白E (apoE)表达的影响,探讨维生素D在动脉粥样硬化发生发展中的意义及可
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
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目的:了解维生素D受体(VDR)特异性siRNA转染对鼠主动脉内皮细胞(EC)增生、凋亡、一氧化氮合酶及载脂蛋白E (apoE)表达的影响,探讨维生素D在动脉粥样硬化发生发展中的意义及可能机制.方法:小鼠主动脉EC分离培养,观察VDR特异性siRNA转染对小鼠EC生长的影响,采用AlamarBlue还原法测定细胞增生活力,采用FLM缺口末端标记法(TUNEL)原位标记凋亡细胞核检测细胞凋亡,采用RT-PCR法检测eNOS mRNA和apoE mRNA表达,并与空白对照组及空载质粒转染组比较.结果:与空白对照组及空载质粒转染组比较,VDR特异性siRNA转染组各时间点(24h、36h、48h)EC增生活力明显下降(P＜0.01)、EC凋亡率明显增加(P＜0.01)、培养液上清NO浓度明显下降(P＜0.01)、eNOS-mRNA表达明显下调(P＜0.01)、eNOS活性蛋白表达明显下调(P＜0.01)、apoE mRNA表达明显下调(P＜0.01).相关分析发现在VDR特异性siRNA转染组,eNOS表达量与细胞凋亡率呈负相关,与apoE mRNA表达呈正相关(P＜0.01).结论:VDR特异性siRNA转染对鼠主动脉EC增生、凋亡、eNOS及apoE表达产生明显影响.提示抑制VDR,可以下调apoE mRNA表达,同时,由于apoE mRNA表达下降,可能是导致EC细胞活力下降、凋亡增加、NO浓度下降、eNOS-mRNA与eNOS活性蛋白表达下调的重要原因.VDR表达下降也可能是参与动脉粥样硬化发生与发展的重要原因.表明维生素D与apoE相关作用影响动脉粥样硬化可能是通过eNOS与AS相关联.
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