【摘 要】
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研究目的:研究腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)肿瘤细胞来源的外泌体(Tumor derived exosomes, TDE)对自身肿瘤细胞增殖能力的影响。研究方法:选取ACC细胞株SACC-8
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研究目的:研究腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)肿瘤细胞来源的外泌体(Tumor derived exosomes, TDE)对自身肿瘤细胞增殖能力的影响。研究方法:选取ACC细胞株SACC-83,采用超滤管浓缩与试剂盒提取相结合的方法从SACC-83的培养上清中提取TDE,通过透射电镜及蛋白免疫印迹法(Western Blot)对所提取的TDE进行鉴定;将SACC-83来源的TDE用荧光染料PKH67标记后与其分泌细胞共培养,采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察SACC-83对于自身来源的TDE的摄取情况;采用MTT细胞增殖实验、细胞划痕实验及Western Blot法检测SACC-83经自身TDE作用后,其细胞增殖能力的变化情况以及ERK/P-ERK蛋白的表达变化。研究结果:透射电镜及Western Blot的检测结果显示,SACC-83培养上清中所提取到的微囊泡直径为30-100nm,且外泌体蛋白标记物CD9、CD63和TSG101的表达为阳性;携带PKH67荧光标记的TDE可被SACC-83摄取。MTT及细胞划痕实验结果示SACC-83来源的TDE可促进自身肿瘤细胞的增殖能力,Western Blot结果显示P-ERK的表达上调,ImageJ软件行蛋白条带灰度值分析并统计显示实验组与对照组具有显著统计学差异(P<0.05)。研究结论:SACC-83来源的TDE可被自身肿瘤细胞摄取,并可显著促进肿瘤细胞的增殖能力,上调P-ERK的表达。该结果提示ACC可能通过TDE途径促进肿瘤细胞的增殖能力,且ERK的活化以及MAPK/ERK信号通路的激活可能是其促细胞增殖的潜在机制之一。
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