【摘 要】
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目的了解银杏叶提取物对砷致肝L-02细胞损伤的干预作用并初步探讨其机制,为砷中毒的防治提供实验依据。方法人正常肝细胞(L-02细胞)在RPMI-1640培养基(含10%胎牛血清、青霉素100
【机 构】
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贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室卫生毒理学教研室;
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目(81430077);国家自然科学基金面上项目(81172603)
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目的了解银杏叶提取物对砷致肝L-02细胞损伤的干预作用并初步探讨其机制,为砷中毒的防治提供实验依据。方法人正常肝细胞(L-02细胞)在RPMI-1640培养基(含10%胎牛血清、青霉素100U/ml、链霉素100μg/m1))中,5%CO2、37℃条件下培养。实验分为对照组、银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,EGb)组、NaASO2组和EGb干预组。其中,对照组在RPMI-1640培养基中进行培养24h;EGb组用200μg/mlEGb作用L-02细胞24h;NaASO2组用20μmol/LNaAsO2作用L-02细胞24h;EGb干预组用20μmol/LNaAsO2作用L-02细胞24h后加入200μg/mlEGb再继续培养24h。每组均设3个平行孔,实验重复三次。MTT法检测细胞活力;彗星实验检测DNA损伤情况;免疫印迹法检测检测ERCC1、ERCC2蛋白表达;qRT-PCR检测miR-145表达。结果与对照组相比,NaAsO2组细胞活力下降,DNA损伤增加,ERCC1及ERCC2蛋白表达下降,miR-145表达升高。与NaAsO2组相比,EGb干预组细胞活力升高,DNA损伤水平下降,ERCC1及ERCC2蛋白表达水平升高,miR-145表达水平下降。结论银杏叶提取物可抑制砷致L-02细胞损伤,提升染砷L-02细胞的活力,降低细胞DNA损伤水平,该过程与其提高核苷酸切除修复基因ERCC1及ERCC2蛋白表达水平和抑制miR-145表达有关。
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