【摘 要】
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目的:通过构建LIM矿化蛋白-1(Lim mineralization protein-1,LMP-1)的真核表达质粒,并在兔骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)内表达,研究LMP-1对
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院骨科 重庆
【出 处】
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第九届中国南方骨质疏松论坛暨江西省骨质疏松学术会
论文部分内容阅读
目的:通过构建LIM矿化蛋白-1(Lim mineralization protein-1,LMP-1)的真核表达质粒,并在兔骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)内表达,研究LMP-1对体外培养BMSCs成骨分化的影响.
方法:RT-PCR克隆LMP-1和BMP-2,并构建plRES2-EGFP-LMP1及pIRES2-EGFP-BMP2重组质粒.分离培养BMSCs,脂质体介导下将pIRES2-EGFP-LMP1、pIRES2-EGFP-BMP2和pIRES2-EGFP质粒转染BMSCs.7d后收集细胞,RT-PCR比较LMP-1、BMP-2及Ⅰ型胶原的表达,检测碱性磷酸酶活性,免疫组化染色比较骨钙素表达.
结果:pIRES2-EGFP-LMP1和plRES2-EGFP-BMP2重组质粒构建成功.重组质粒成功转染BMSCs,RT-PCR证实表达目的基因,LMP-1和BMP-2转染组可以明显促进细胞分泌ALP的活性,诱导Ⅰ型胶原和骨钙素的表达.
结论:LMP-1可以促进BMSCs向成骨细胞分化.
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