目的为造血干细胞的低温保存选择合适的保护剂、简便的降温条件和保存方法。方法外周血细胞,加入单一或组合的不同浓度的二甲基亚砜（DMSO）、羟乙基淀粉（HES）,超低温冰箱或程控降温,超低温冰箱或液氮保存,定期检测标本的粒单系造血细胞（CFU-GM）,长期培养起始细胞（LTC-IC）生长,CD34+细胞、台盼蓝拒染（TBR）计数,计回收率。结果:冻前2×105外周血细胞CFU-GM,LTC-IC分别是:48．5±18．6（30-88）,66．2±29．5（33-92）;CD34+细胞百分率: 是（2．2±1．1）％,TBR是（99．0±1．2）％。用5％％DMSO-6％HES为保护剂的超低温冰箱降温保存, CFU-GM、LTC-IC、CD34+、TBR回收率分别为:（82．2±14．7）％、（83．0±12．2）％、（94．2±4．3）％、 （97．7±3．9）％,与10％％DMSO为保护剂的超低温冰箱降温保存比,回收率明显高,差异明显（P 0．05）;超低温冰箱降温保存、程控降温液氮保存和超低温冰箱降温液氮保存,在一年内,造血干细胞保存良好,各种回收率无明显差异（P>0．05）,二年时,只有超低温冰箱降温保存的CFU-GM、LTC-IC、CD34+、 TBR回收率分别下降至（71．6±19．0）％、（72．9±17．7）％、（93．8±4．0）％、（92．3±5．0）％,其余未见明显下降;细胞复温后,细胞内保护剂不稀释也不洗涤,随着在室温放置时间的延长,造血细胞活力的各指标均随之下降,含10％DMSO者室温放置60min,CFU-GM、LTC-IC、CD34+、TBR回收率分别下降至（30．4±23．5）％、（32．4±26．9）％、（87．0±8．6）％、（42．8±20．2）％,而含5％DMSO-6％HES 者虽然对细胞也有影响,但比10％DMSO影响要小得多,室温放置60min时,CFU-GM、LTC-IC、 CD34+、TBR回收率分别下降至（56．7±21．9）％、（55．4±22．2）％、（88．2±6．7）％、（80．3±18．9）％。结论造血干细胞的保存,保护剂用5％DMSO-6％HES,保存时间不超过一年时,用超低温冰箱降温保存,如长期保存,超低温冰箱降温液氮保存,细胞复温后,保护剂应立即稀释（临床应用）或去除。