【摘 要】
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目的：探讨miR-199a在2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠中的作用情况及雷公藤多苷(TWP)对其的干预作用.方法：采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠法建立溃疡性结肠炎动物模型.对大鼠结肠组织进行大体形态损伤评分和镜下结肠损伤评分；采用芯片分析、Real-time PCR技术评估各组结肠粘膜组织中miR-199a的表达水平；针对milwalk
【机 构】
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浙江中医药大学附属第一医院消化内科,浙江杭州310006;浙江中医药大学第一临床医学院,浙江杭州310053
【出 处】
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中华中医药学会脾胃病分会第二十八届全国脾胃病学术交流会
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目的：探讨miR-199a在2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠中的作用情况及雷公藤多苷(TWP)对其的干预作用.方法：采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠法建立溃疡性结肠炎动物模型.对大鼠结肠组织进行大体形态损伤评分和镜下结肠损伤评分；采用芯片分析、Real-time PCR技术评估各组结肠粘膜组织中miR-199a的表达水平；针对milwalk数据库中预测的下游靶基因mRNA用表达谱进一步筛选分析靶基因mRNA,并用Real-time PCR技术验证靶基因mRNA在各组中的表达,最后在DAVID数据库进行pathway分析,以分析miR-199a参与UC炎症活动时所调节的靶基因mRNA.结果：1.TWP高剂量组结肠黏膜大体形态损伤评分、组织病理损伤评分与模型对照组间差异有统计学意义(P＜0.01).2.芯片分析显示模型对照组中miR-199a较正常对照组上调(p＜0.01),在AZA组表达较模型对照组下调(p＜0.01,p＜0.05).miR-199a-3p在TWP中剂量组,miR-199a-5p在TWP高剂量组中较模型对照组均下调(p＜0.05)3.miR-199a的Real-time PCR结果显示,模型对照组miR-199a的表达水平较正常对照组明显上调(p＜0.01)；TWP的中、高剂量组和AZA组中miR-199a-3p的表达水平较模型对照组均下调(p＜0.05)；TWP中剂量组miR-199a-5p的表达水平较模型对照组下调(p＜0.05).4.表达谱分析显示,FASL为miR-199a的靶基因.模型对照组中靶基因FASL表达水平较正常对照组上调(p＜0.05),TWP组、AZA组中靶基因FASL表达水平较模型对照组下调,其中以AZA组的下调为显著(p＜0.01).5.靶基因FASL的Real-time PCR结果显示,模型对照组中靶基因FASL表达水平较正常对照组明显上调(p＜0.01)；TWP中剂量组、高剂量组和AZA组中靶基因FASL表达水平较模型对照组下调(p＜0.01).结论：miR-199a在TNBS/乙醇UC大鼠中有上调表达,FASL是miR-199a的下游靶基因.TWP能改善UC的炎症活动,对UC活动时上调的miR-199a具有下调作用；FASL在UC活动时呈上调表达,TWP对miR-199a下游靶基因FASL具有下调作用.
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