家蚕死亡相关蛋白BmSCLP的表达、纯化及多克隆抗体的制备

来源 :华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:langya925
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  从家蚕蛹cDNA文库中获得家蚕死亡相关蛋白BmSCLP的cDNA序列.该cDNA序列长1557bp,含642bp的ORF序列,编码213个氨基酸残基.将克隆的该基因插入pET-28a构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21后诱导表达融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化得到较纯的目的蛋自,再通过反相快速液相色谱(RP-FPLC)进一步纯化,质谱鉴定该蛋白的相对分子质量为27.74kD,将纯化好的目的蛋白作为抗原多次免疫新西兰大白兔后,ELISA检测结果证实产生了滴度较高的多克隆抗体.
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