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目的:通过观察丹川红及其吸收成分FTA(Ferulic acid/阿魏酸、Tanshinol/丹参素、Hydroxysaffior yellow A/羟基红花色素A)对大鼠离体胸主动脉环及大鼠胸主动脉内皮细胞的作用,进一步探讨丹川红的舒血管机理.方法:建立UPLC-MS/MS方法对丹川红及其灌胃大鼠吸收入血成分进行分析测定.采用离体血管张力实验方法记录丹川红及其吸收成分对10μmol/l肾上腺素(PE)预收缩血管环张力变化.化学发光法测定丹川红吸收成分对内皮细胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)含量的影响.采用western印迹和RT-PCR法分析丹川红吸收成分对内皮细胞内皮源性舒张因子一氧化氮(NO)合成信号通路PI3K/AKT/eNOS关键蛋白AKT、eNOS及其磷酸化形式(p-Akt Ser473、p-eNOS Ser1177)蛋白表达的影响.结果:第一部分:丹川红及其灌胃大鼠血浆中F、T、A能被同时检测到并作为该方的体内主要吸收活性成分(ABC).第二部分:丹川红及其吸收成分F、T、A分别对苯肾上腺素(PE)预收缩的离体大鼠胸主动脉环有明显的浓度依赖性舒张效应.T对完整及去内皮主动脉环最大舒张为96±4%、9±0.1%(P<0.01,P>0.05).F对完整与去内皮主动脉环最大舒张为94±4.6%与85±3.8%(P<0.01与P<0.01).A对完整及去内皮主动脉环最大舒张为92±3.7%、81%±2.5%(P<0.01,P<0.01).DCH对完整及去内皮主动脉环最大舒张为82%±3.3%、76%±1.9% (P<0.01,P<0.01).第三部分:与对照组相比F、T、A与内皮细胞共同孵育24h后,细胞内TNOS活性显著增加至161.5±1.69、258.25±3.18和322.275±3.67μ/ml(P<0.05,P<0.01和P<0.01).与对照组相比T、A预处理的血管内皮细胞内iNOS活性减低为4.635±0.466、5.266±0.286μ/ml(P<0.01,P<0.05);F预处理组细胞内iNOS活性为5.997±0.296μ/ml (P>0.05).与对照组相比F、T、A预处理后培养液中NO含量均明显增加,分别为686.742±44.73、817.667±85.386、1064.33±115.914μmol/L(P<0.05,P<0.01,P<0.01).第四部分:吸收成分T、A组细胞内AKT相对蛋白含量与对照组相比增加较明显(P<0.01);F组与对照组相比细胞内AKT相对蛋白表达增加不明显(P>0.05).与对照组相比F、T、A均能明显促进细胞内AKT蛋白磷酸化变化(P<0.01).与对照组相比F、T、A均能使细胞内eNOS蛋白表达增加,激活eNOS蛋白磷酸化(P<0.01).结论:FTA是丹川红主要吸收药效成分,能分别抑制离体大鼠胸主动脉环收缩的是丹川红及其T、F和A,前者没有,后2者由对去内皮血管环收缩没有抑制作用.TFA能激活细胞内PI3K/AKT/eNOS信号通路使蛋白AKT、eNOS及其磷酸化形式蛋白的表达增加,内皮源性舒张因子一氧化氮释放增加,是丹川红汤剂缓解血管收缩的药效物质基础,是F、T、A内皮依耐性血管舒张作用的分子机制,内皮依耐性的血管舒张是丹川红舒张离体胸主动脉环的机制之一,T主要通过内皮依耐产生舒血管作用.F、A的舒血管作用是内皮依赖性和非内皮依赖性联合作用的结果.