【摘 要】
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目的：研究白介素-22(interleukin-22,IL-22)对乙醛诱导的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)活化增殖的影响.方法：(1)体外培养HSC-T6s,采用不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的乙醛刺激24h、48h后,MTT法测定细胞增殖率以筛选出最佳造模条件.(2)用最适浓度的乙醛(200μmol/L)处理HSC-T6s24h后,
【出 处】
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2017中国医师协会消化医师分会年会
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目的：研究白介素-22(interleukin-22,IL-22)对乙醛诱导的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)活化增殖的影响.
方法：(1)体外培养HSC-T6s,采用不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的乙醛刺激24h、48h后,MTT法测定细胞增殖率以筛选出最佳造模条件.(2)用最适浓度的乙醛(200μmol/L)处理HSC-T6s24h后,再分别加用不同浓度的IL-22(10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml)干预24h,MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting和细胞免疫组化(ICC)检测o-平滑肌抗原(Smooth muscle antigen,α-SMA)蛋白的表达情况.(3)采用SPSS17.0软件进行统计学分析,结果以均数±标准差(X±s)表示,P＜0.05认为差异有统计学意义.多组样本均数的两两比较采用One-way ANOVA分析.
结果：(1)MTT显示乙醛刺激后HSC-T6s增殖明显增强,以200μmol/L作用48h最为明显.加用梯度浓度的IL-22干预后,HSC-T6s的增殖呈剂量依赖性的抑制(P＜0.05).(2)流式细胞术结果显示乙醛刺激后HSC-T6s G0/G1期的细胞比例明显降低,S期比例明显升高;加用IL-22干预后HSC-T6s则发生G1/S期阻滞,且呈现出剂量依赖性.(3)western blotting和ICC结果均显示模型组HSC-T6s内α-SMA表达明显上调(P＜0.05),而IL-22干预后则可呈剂量依赖性的抑制α-SMA蛋白表达.
结论：乙醛诱导HSC活化增殖,成功建立了酒精性肝纤维化的体外模型;IL-22对乙醛诱导的HSC活化增殖均有明显的抑制作用.
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