rno-miR-122与rno-miR-182在对ACI大鼠移植性肝癌经动脉栓塞的相关功能性研究

来源 :中华放射学学术大会2016、中华医学会第23次全国放射学学术大会暨中华医学会第24次全国影像技术学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cykic
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  目的 探讨经动脉栓塞对ACI大鼠移植性肝癌中microRNAs相对表达水平和潜在功能的影响,寻找与肝癌发生发展相关的miRNAs,为寻找评估疗效及预后的生物标志提供线索.材料与方法 30只ACI大鼠随机为A、B两组,每组15只,均被行肝癌移植.A组在肝癌移植14d后予TAE,B组未行TAE.A组在TAE术前以及术后7d,测量肿瘤最大长径和垂直短径,计算体积.B组则在肿瘤移植14d后同法测量,并计算体积.在TAE7d后采集A组的癌和癌旁组织.B组在肝癌移植14d后采集的癌和癌旁组织.抽提总RNA后利用IlluminaSolexa平台行高通量深度测序,表达差异显著者作为候选miRNA.利用TaqmanqRT-PCR方法验证其在各对组织样本中的相对表达水平;预测备选miRNA的靶基因.构建载体,转入HEK293T细胞中以获得目的基因的表达,并用双荧光检测.结果 A组TAE前与B组的肿瘤体积无显著性差异,其中A组TAE前与TAE术后7d的肿瘤体积存在统计学显著性差异,肿瘤体积明显缩小.miR-122在组织样本中相对表达水平的低通量qRT-PCR验证结果显示,miR-122在未接受经动脉栓塞的癌组织中低表达,在接受经TAE并且缩小的癌组织中表达较术前上调;分析预测并得到miR-182所作用的潜在靶基因cebpa及其与miR-122间的信号通路,并在大鼠肝癌和癌旁组织中的得到表达验证.通过对HEK293T细胞进行转染及双荧光报告基因检测,证实了Cebpa是miR-182的直接靶基因.结论 经动脉栓塞能够使大鼠肝癌肿瘤缩小,miR-122在肝癌的发生发展过程中起着抑癌的作用,TAE后miR-122表达上升.在肝癌中miR-182高表达进而对Cebpa抑制,而Cebpa的抑制进一步抑制miR-122的表达,导致癌细胞增殖.该通路可能是用来进行疗效和生存预后评估的生物标志物.
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