【摘 要】
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从哈茨木霉突变株库中筛选到一株突变株T66.该突变株孢子包衣处理玉米种子后,发现玉米对弯孢叶斑病抗性明显低于野生株.病情指数为62.5％,而野生株处理后的病情指数为42.1％.
【机 构】
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上海交通大学农业与生物学院,上海200240
【出 处】
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中国植物病理学会2014年学术年会
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从哈茨木霉突变株库中筛选到一株突变株T66.该突变株孢子包衣处理玉米种子后,发现玉米对弯孢叶斑病抗性明显低于野生株.病情指数为62.5％,而野生株处理后的病情指数为42.1％.Southern blot分析表明T-DNA为单拷贝插入.通过反向PCR扩增到侧翼序列,分析后表明,突变株与野生株的功能差异是因为T-DNA插入到基因的ORF框,该基因命名为Thc6,编码327个氨基酸,属于C6型锌指转录因子.利用该基因的敲除子、互补子及过表达子分析基因的功能,结果表明,该基因是木霉菌诱导玉米抗弯孢叶斑病的重要调控基因.qRT-PCR分析寄主防御反应相关基因表达,并利用LC-MS测定寄主SA、JA含量变化,证明该基因通过影响玉米的茉莉酸代谢通路从而调控玉米的抗病能力.以上结果表明,Thc6通过调控玉米茉莉酸代谢相关通路,从而调控玉米对弯孢叶斑病的抗性.为了研究该基因调控的分子机理,我们通过酵母单杂交技术从哈茨木霉基因组中筛选到两段与该蛋白互作的DNA片段,扩增侧翼序列,并结合生物信息学分析,获得被Thc6调控的两个多糖水解酶基因Thph1、Thph2.EMSA实验确定蛋白与基因启动子区的结合区域为6个碱基的保守区域.关于这两个基因的具体功能,及Thc6对这两个基因的调控及三基因的互作关系有待进一步实验证明.
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