【摘 要】
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本研究旨在寻找猪囊尾蚴发育过程中的关键酶-半胱氨酸蛋白酶在猪体内不同时期的表达情况进,为阐明猪囊尾蚴的代谢规律奠定理论基础.本实验建立了猪囊尾蚴实验动物模型,实验前
【机 构】
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吉林农业大学动物科学技术学院,吉林,长春,130118
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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本研究旨在寻找猪囊尾蚴发育过程中的关键酶-半胱氨酸蛋白酶在猪体内不同时期的表达情况进,为阐明猪囊尾蚴的代谢规律奠定理论基础.本实验建立了猪囊尾蚴实验动物模型,实验前,用醋酸地塞米松免疫抑制实验小鼠,通过口服激活、未激活囊尾蚴和尾静脉注射激活的囊尾蚴三种方式感染昆明小鼠、BALB/c小鼠、SD大鼠、豚鼠、金黄地鼠、沙鼠,对各种鼠体内的绦虫的感染、发育和生长部位等特性进行研究.在感染45天的3只金黄地鼠体内检出可见虫体,虫体多数吸附在小肠上.结果成功的构建了猪带绦虫金黄地鼠实验动物模型,从本质上解决实验材料的问题,同时为猪带绦虫病的研究打下了良好的基础.通过猪体内繁殖猪囊尾蚴的方法,分别取感染了40天、60天、90天的猪囊尾蚴虫卵,Trizol法分别提取三个不同时期猪囊尾蚴总RNA,用Primer Premier 5.0软件设计引物,RT-PCR扩增猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶基因,产物纯化后与pMD18:T载体的连接转化,质粒测序,利用重组质粒制作荧光定量PCR标准曲线,进行荧光定量PCR反应.猪在感染猪带绦虫孕节片40d,取出的囊尾蚴中已经有半胱氨酸蛋白酶产生,随着感染时间的增加,猪囊尾蚴CP表达量也有所增加,在感染60d时,猪囊尾蚴基本成熟,到了感染90d时,半胱氨酸蛋白酶的表达量趋于平稳状态.
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