【摘 要】
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目的：探讨不同培养基环境对人脐静脉内皮细胞生物学特征的影响.方法：人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC),来源于新生儿脐带的内皮细胞,取材方
【机 构】
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武汉大学人民医院眼科中心,武汉大学人民医院眼科研究所 430060
【出 处】
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第十二届全国角膜及眼表疾病学术大会暨第四届全国角膜屈光手术大会
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目的：探讨不同培养基环境对人脐静脉内皮细胞生物学特征的影响.方法：人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC),来源于新生儿脐带的内皮细胞,取材方便,具有分化潜能和新生血管内皮细胞的特性是目前研究血管内皮细胞的主要来源,在血管新生过程中,内皮细胞的迁移是一个化学趋化过程,是一个很重要的步骤,并广泛用眼部新生血管,特别是角膜新生血管,糖尿病并发的眼底新生血管等多种实验中.3组HUVEC分另培养于ECM完全培养基、含1％内皮细胞生长添加剂(endothelial cell growth supplement,ECGS)的DMEM培养基及不含ECGS的DMEM培养基.培养过程中观察细胞的形态特征,同时行免疫荧光染色检测第八因子相关抗原表达情况,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测生长周期,基质胶中形成形成小管样结构,以及Boyden小室检测HUVEC细胞侵袭力.结果：各组细胞约于8h后95％贴壁,第2-3天后呈单层梭型或铺路石样结构,第3-5天时细胞铺满培养瓶瓶底.Ⅷ因子、CD34免疫荧光法证实为内皮细胞荧光表达.培养不同时间(8、12、24、48、72h)后,MTT检测发现第8h和12h时各组HUVEC的活力之间没有差异,第24、48、72h时ECM组和含1％ECGS的DMEM组HUVEC的活力较DMEM组有显著增强(P＜0.05),细胞的增殖指数明显增高,s生长周期明显差异,(P＜0.05),HUVEC在基质胶中72 h时形成小管样结构及Boyden小室检测HUVEC细胞侵袭及运动能力有显著差异(P＜0.05).结论：含I％ECGS的培养基培养的HUVEC细胞生物活性较好,为后续实验提供稳定传代的细胞.
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