高效液相色谱测定伏立康唑血药浓度的方法建立和应用

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目的:建立高效液相法测定血浆中伏立康唑的浓度,以此监测血浆中伏立康唑的谷浓度,为临床调整用药量提供参考。方法:内标法,以醋酸可的松为内标,血样加入内标后,先经乙酸乙酯和二氯甲烷的混合溶液进行二次液液萃取,合并有机相后吹干、用流动相复溶,进样。色谱条件:Agilent Eclipse Plus–C18(4.6×50?mm, 5?μm)色谱柱;流动相为0.05%甲酸溶液-乙腈=60:40;流速为1.0 ml/min;柱温25oC;检测波长256 nm;进样体积:40μL。方法建立完毕后,用此方法监测两例患儿血浆中伏立康唑的谷浓度。结果:伏立康唑在0.25-10.12μg/mL浓度范围内色谱峰面积与其相应的内标的峰面积比值呈良好线性关系Y=0.4494X+0.0071,(r=0.9997);低中高三种浓度(0.51,2.02,8.10μg/mL)日内RSD(n=5)为2.28%-3.16%,日间RSD(n=3)为3.93%-5.04%;方法学回收率为94.3%-108.2%。低中高三种浓度(0.51,2.02,8.10μg/mL)浓度的血浆样本在室温放置6h,冻融一次,冷冻保存2周等不同温度条件下的稳定性良好。将有效浓度范围设为1-5.5μg/mL,两例患儿谷浓度均偏小,未达最低有效治疗浓度。可见儿童血浆中伏立康唑的浓度受多重复杂因素的影响,在偏低的给药剂量下一般低于有效治疗浓度的下限。结论:本研究建立了建立高效液相法测定血浆中伏立康唑的浓度,该方法专属性、重复性、准确性较好,可用于血浆中伏立康唑的含量测定。我院儿童伏立康唑的给药剂量偏低,建议提高,以达有效血药浓度。
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