【摘 要】
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为阐明牛源犬新孢子虫 NcSRS2-NcGRA7 复合基因核酸疫苗与重组腺病毒疫苗的免疫保护作用机制,本研究应用SOE-PCR 技术获得1482 bp 的NcSRS2-NcGRA7复合基因；制备了牛源犬
【机 构】
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延边大学农学院动物医学系 吉林 延吉 133000
【出 处】
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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会
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为阐明牛源犬新孢子虫 NcSRS2-NcGRA7 复合基因核酸疫苗与重组腺病毒疫苗的免疫保护作用机制,本研究应用SOE-PCR 技术获得1482 bp 的NcSRS2-NcGRA7复合基因；制备了牛源犬新孢子虫pVAX1-NcSRS2-NcGRA7 核酸疫苗；构建了pCR259-NcSRS2-NcGRA7 重组腺病毒穿梭质粒和重组腺病毒表达质粒,制备了滴度为109 TCID50/mL 的Ad5-NcSRS2-NcGRA7 重组腺病毒疫苗；应用核酸疫苗和重组腺病毒疫苗建立了Prime-Boost 免疫策略,经对Prime-Boost 和单疫苗接种小鼠的抗体水平、T 淋巴细胞亚群变化及细胞因子水平等指标的检测分析,证实Prime-Boost 诱导小鼠的免疫应答水平显著优于重组腺病毒疫苗和核酸疫苗；经对攻虫小鼠的临床症状观察,主要脏器组织虫体含量、病理学变化及其生殖机能等各项指标的检测表明,Prime-Boost 和Ad5-NcSRS2-NcGRA7 免疫保护率最高,pVAX1-NcSRS2-NcGRA7 次之；证实Prime-Boost 和Ad5-NcSRS2-NcGRA7 在提高机体免疫水平的同时,有效抑制了虫体对脏器组织细胞的侵袭,尤其Prime-Boost免疫保护作用优势显著。本项目为新孢子虫病新型疫苗的临床应用及该病的防控研究奠定了基础。
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