【摘 要】
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本研究专注构建基因敲除载体，通过同源重组以两端带有loxpLE/RE位点的Km抗性基因替换原基因；由pDTW109在菌体内表达Cre酶，利用其介导的变异loxpLE/RE位点间的位点特异重组去
【机 构】
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江南大学食品科学与技术国家重点实验室食品安全研究室516,江苏省无锡市
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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本研究专注构建基因敲除载体，通过同源重组以两端带有loxpLE/RE位点的Km抗性基因替换原基因；由pDTW109在菌体内表达Cre酶，利用其介导的变异loxpLE/RE位点间的位点特异重组去除Km基因；pDTW109可由其温敏特性而丢失，同时遗留于基因组上一个无法被Cre酶识别的变异IoxpLR位点。本文中利用该系统连续敲除了C.glutamicum ATCC 14067中aceE及ilvA，证明该系统可用于同一菌株中多个基因的连续敲除。
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