黄芩苷对耐药大肠杆菌marA基因mRNA表达水平影响

来源 :中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kary_yeah
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  为探究黄芩苷对耐药大肠杆菌主动外排调控基因marA的mRNA表达水平的影响,微量肉汤稀释法确定黄芩苷增敏环丙沙星的最佳浓度,然后对8株耐药菌株采取不加任何药物、单独加32μg/mL黄芩苷或4μg/mL环丙沙星、32μg/mL黄芩苷和4μg/mL环丙沙星联合及16μg/mL CCCP和4μg/mL环丙沙星联合等5种方式培养耐药菌株,抽提总RNA并反转录cDNA,荧光定量PCR,测定主动外排调控基因marA及管家基因gapA的Ct值,并计算不同培养条件下各个耐药大肠杆菌marA的mRNA相对表达量.结果显示,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数R2=1.00,溶解曲线特异,marA基因产物Tm在81.8~82.1℃之间;黄芩苷与环丙沙星联用培养的耐药菌外排泵基因marA表达量与环丙沙星单独培养相比明显下降,前者介于0.71~2.06之间,后者介于2.27~7.28之间,以上结果表明黄芩苷可以通过抑制外排泵调控基因marA发挥作用,提示其可能作为大肠杆菌的外排泵抑制剂应用于临床.
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