【摘 要】
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目的研究肺炎克雷伯菌多粘菌素B耐药相关机制。方法琼脂稀释法检测4株多粘菌素B(polymyxin B,PB)临床耐药株(FK1149、FK1920、FK1934、FK2064)和5株PB体外诱导耐药株(FK660R
【机 构】
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温州医科大学检验医学院生命科学学院; 温州医科大学附属第一医院医学检验中心;
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目的研究肺炎克雷伯菌多粘菌素B耐药相关机制。方法琼脂稀释法检测4株多粘菌素B(polymyxin B,PB)临床耐药株(FK1149、FK1920、FK1934、FK2064)和5株PB体外诱导耐药株(FK660R、FK688R、FK702R、FK713R、FK729R)对13种临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。PCR方法检测pmrA、pmrB、phoP、phoQ和mgrB基因并测序比对分析。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测pmrH、pmrC、pmrD、phoP和mgrB基因的表达情况。结果多粘菌素耐药不仅发生于多重耐药菌中,也可发生于敏感菌中。FK1920菌株中检出MgrB(F44C)突变,FK1 149、FK1934和FK2064中检出PmrB(R256G)和PhoQ(D150G)突变,FK2064中还检出了PhoQ(Y394S)突变。5株体外诱导PB耐药株中全部检出PmrB(T157P)突变;FK713R和FK729R的mgrB基因中分别检出ISkpn14和IS5-like插入序列。qRT-PCR结果显示除FK2064外,所有菌株pmrH或pmrC的表达量都有不同程度的升高,同时FK1149和FK1920中pmrD基因表达量升高;FK713R和FK729R中phoP基因表达量升高;但FK1920和FK713R中mgrB基因表达量降低。结论肺炎克雷伯菌中PB耐药机制除与PmrAB和PhoPQ调控系统有关外,其他调控系统及相关机制也可能参与调控PB耐药。
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