【摘 要】
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目的：从6B、9V、14、19F型肺炎球菌培养物中纯化得到肺炎球菌溶血素(PLY)，并通过动物实验观察比较其免疫原性和交叉保护作用。 方法：采用超声破碎、硫酸铵沉淀以及三步柱层析
【机 构】
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北京生物制品研究所,北京,100024
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目的：从6B、9V、14、19F型肺炎球菌培养物中纯化得到肺炎球菌溶血素(PLY)，并通过动物实验观察比较其免疫原性和交叉保护作用。
方法：采用超声破碎、硫酸铵沉淀以及三步柱层析法纯化PLY，并通过测定PLY免疫小鼠后血清抗体滴度，统计活菌攻击后小鼠存活率来验证其保护效果。
结果: 纯化PLY回收率依次28％，48％，34％和17％；比活性依次为2.9×104，HU.mg，3.1×104HU/mg，1.6×104HU/mg和1.8×104HU/mg；纯度依次为83.4％，99.2％，70.1％和76.6％；9V型PLY SDS-PAGE扫描结果显示其表观分子量为52.84，与文献报道的53kD相一致。从四种血清型肺炎球菌中纯化的PLY均能诱导小鼠产生高且稳定持久的抗体滴度。各免疫组小鼠以鼻腔黏膜途径均分别感染2、6B、9V、14、19F型肺炎球菌，结果各免疫组小鼠存活率均显著高于其对照组。
结论: 由于9V型PLY对小鼠的保护作用与其它型PLY无显著差异，且在本实验所纯化的四个型PLY中纯度最高，所以9V型肺炎球菌足本课题选出的可得到高纯度PLY的优势菌株。说明PLY具有良好的免疫原性，验证了各型PLY对本型肺炎球菌感染的保护作用和对其他型肺炎球菌感染的交叉保护作用。
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