基于果蝇RNA干扰系研究运动抗衰老候选基因Trpa1的功能

来源 :2012年中国运动生理生化学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:linxulong07
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  目的:构建果蝇Trpa1基因RNAi系,以存活指数、运动能力及心脏功能3项指标评价候选基因Trpa1在运动抗衰老中的功能效应.方法:扩大培养UAS-Trpa1 RNAi系、Hand>Trpa1 RNAi系,取同天龄雄性果蝇各2400只,随机分成:Hand>Trpa1 RNAi平板运动组(1200只),Hand>Trpa1 RNAi安静组(1200只),UAS-Trpa1 RNAi运动组(1200只),UAS-Trpa1 RNAi安静组(1200只),20只/管(饲养条件:25℃恒温,50%湿度,12小时昼夜循环光照).运动组8天龄执行规律性平台训练,运动时间2.5小时,隔天训练一次,视频检测系统监控运动强度,电机转速24s/r,平台起降高度9.5cm,至33天龄方案结束.存活指数检测:方案结束后24小时开始,每天记录各组别果蝇死亡数,制作存活曲线;运动能力监测:方案结束后24小时开始,视频检测系统计数规定时间内各区域果蝇数,各区果蝇总得分之和为果蝇攀爬指数;心脏功能检测:脉冲电激仪PHIPPS&BIRD设定值为40V,6Hz,取各组14天龄、28天龄、42天龄果蝇各100只持续30s刺激,两分钟内观察心管恢复情况(可出现正常、纤维性颤动、停止3种情况),计算心管纤维性颤动和停止跳动果蝇数与总数百分比即为心衰竭率.实验数据采用SPSS17.0软件处理,各组别之间显著性差异采用单因素方差分析,组内显著性差异采用t检验,显著性水平为α=0.05和α=0.01.结果:与对照组相比,UASTrpa1 RNAi品系运动组果蝇平均寿命和最高寿命延长(P<0.01),平均延寿率为+4.03,结果具有统计学意义;Trpa1基因沉默系运动组果蝇平均寿命和最高寿命缩短(P<0.01),表现对运动训练的不适应,Trpa1基因沉默系安静组果蝇平均寿命和最高寿命没有变化;果蝇年龄的增加导致攀爬能力下降,与对照组相比,Trpa1基因沉默系果蝇移动能力下降明显,Trpa1基因沉默系运动组果蝇攀爬能力曲线在40天龄后下降尤为剧烈;Hand>Trpa1 RNAi品系运动组果蝇14天龄、28天龄、42天龄的心衰竭率分别为30%、63%、92%,心衰竭率高(P<0.01).结论:Trpa1基因沉默可导致果蝇生命周期缩短,2.5小时规律平台运动训练延缓UAS-Trpa1 RNAi品系果蝇攀爬能力衰退,但Trpa1基因的表达抑制可导致果蝇运动能力下降,同时增加心衰竭率,推测Trpa1基因在果蝇运动抗衰老中发挥重要作用.
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