【摘 要】
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为研究鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌的5个假基因与其特殊的运动表型及致病性的关系，开展了Strs反向筛选体系的建立及大肠杆菌flgK基因敲除和替换菌株的构建工作。设计引物扩增鸡白
【机 构】
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浙江大学,动物科学学院,杭州,310058
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会
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为研究鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌的5个假基因与其特殊的运动表型及致病性的关系，开展了Strs反向筛选体系的建立及大肠杆菌flgK基因敲除和替换菌株的构建工作。设计引物扩增鸡白痢沙门氏菌CVCC527的flgK基因，转化RED重组系统诱导表达的敲除菌株DH10B_flgK-和TOP10_flgK-感受态，经链霉素平板筛选，获得链霉素耐药菌株;将这些耐药菌株进一步点种于Kan平板，确认Kan抗性的丢失，最后从StrRKans菌株中用PCR方法鉴定出被CVCC527的flgK基因定点替换的准确菌株，分别命名为DH10B_flgKsp和TOP10_flgKsp。有关flgK基因敲除菌株和替换菌株的生物学特性表型测定工作正在进行中。
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