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精氨酸能够提高母猪胎盘滋养层细胞的增殖、分化、浸润及融合,促进母猪胎盘生长发育及血管生成,提高胎盘效率,从而提高胚胎成活率,增加窝产活仔数.一氧化氮(NO)和多胺是生物体精氨酸生化反应的两个重要代谢产物,并在动物体内发挥重要的生理调控功能.精氨酸促进母猪胎盘滋养层细胞增殖分化的机制是通过其代谢产物NO和多胺介导发挥调控作用是本课题研究的重点.实验选用生长良好的母猪胎盘滋养层细胞等细胞数量接种于96孔培养板,培养24小时后,进行实验处理[1.最适宜滋养层细胞增殖分化精氨酸浓度0.4 mmol/L;2.0.4 mmol/L精氨酸+3 mmol/L的N-甲基-L-精氨酸(L-NMMA,总NOS抑制剂),0.4 mmol/L精氨酸+3 mmol/L的L-NMMA+0.5 mmol/L的硝普钠(SNP,氧化氮供体);3.0.4 mmol/L精氨酸+5.0 mmol/L的二氟甲基鸟氨酸(DFMO,鸟氨酸脱羧酶抑制剂),0.4mmol/L精氨酸+5.0 mmol/L的DFMO+10μ mol/L腐胺].采用不同实验培养液继续培养4天,分别用相差显微镜、扫描电镜、流式细胞仪、MTT法、高效液相色谱(HPLC)等实验仪器和方法检测精氨酸及其代谢产物NO和多胺对母猪胎盘滋养层细胞增殖分化的影响.实验结果表明,①0.4 mmol/L精氨酸促进了细胞的增殖分化,提高细胞和上清液中NO和腐胺的浓度,同时提高了细胞中iNOS和鸟氨酸脱羧酶(ODC)的酶活(P<0.05).②添加L-NMMA,显著降低了细胞上清液中NO的含量(P<0.05),细胞阻滞于S期,增殖分化显著降低;添加SNP,可以恢复细胞增殖的速率(P<0.05).③添加DFMO抑制了细胞中ODC的活性,减少了细胞上清液中多胺的含量(P<0.05),细胞增殖率显著降低(P<0.05),添加腐胺对抑制ODC的细胞增殖起到促进作用(P<0.05).以上结果表明,最适宜滋养层细胞增殖分化精氨酸浓度培养液中,抑制细胞NO和多胺的生成,都会降低细胞的增殖;添加NO和多胺供体,会显著地提高细胞增殖;精氨酸促进母猪胎盘滋养层细胞增殖分化的机制是通过NO和多胺介导发挥作用.