基于DD3启动子的前列腺癌转移瘤靶向光学分子成像研究

来源 :中华放射学学术大会2016、中华医学会第23次全国放射学学术大会暨中华医学会第24次全国影像技术学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gliu0307
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  目的:构建具有组织特异性的光学报告基因探针PDD3-Luc,实现活体动物模型中基因、分子水平上的前列腺癌转移瘤的靶向光学分子成像. 方法:1、通过分子克隆、基因重组和病毒包装技术构建Ad.PDD3-Luc报告基因探针;2、将重组后的病毒载体感染22RV1细胞、4T1细胞和293T细胞,通过Luc荧光值测定法定量分析该基因探针在不同细胞内的表达情况,以验证该探针的前列腺癌细胞靶向性;3、对感染后的正常细胞、前列腺癌细胞及其他肿瘤细胞进行光学成像光学成像;4、通过皮下种植的方法,构建前列腺癌转移瘤小鼠模型,对注射病毒后的前列腺癌转移瘤小鼠模型进行14天的动态光学成像,评价该探针对前列腺癌转移瘤的靶向光学成像效果;5、成像结束后处死小鼠,分离其胸椎转移瘤进行HE染色. 结果:1、成功构建了由DD3启动子调控的,携带荧光素酶报告基因的腺病毒载体Ad.PDD3-Luc,经细胞实验证实可该基因探针可在前列腺癌细胞内特异性地过表达Luc蛋白;2、Ad.PDD3-Luc转染后,293T及4T1细胞均无荧光发出,而22RV1细胞有荧光显示;3、经连续14天检测,于小鼠胸椎区有荧光显示,解剖后HE染色证实该荧光区为前列腺癌的胸椎转移瘤. 结论:本研究利用组织特异性启动子——DD3启动子调控荧光素酶报告基因的表达,成功实现了前列腺癌转移瘤的活体靶向光学分子成像.本研究结果可用于前列腺癌转移瘤的早期诊断,并有望为其定向手术治疗提供实时影像监测.
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