【摘 要】
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目的：建立四氯化碳诱导的兔肝纤维化动物模型，观察体外分离标记的自体骨髓单核细胞(ABM-MNCs)经肠系膜上静脉自体移植至肝纤维化区及周边区后的存活、定植状况.方法：将40只普通
【机 构】
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解放军昆明总医院干细胞与组织器官工程研究中心,昆明650082
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目的：建立四氯化碳诱导的兔肝纤维化动物模型，观察体外分离标记的自体骨髓单核细胞(ABM-MNCs)经肠系膜上静脉自体移植至肝纤维化区及周边区后的存活、定植状况.方法：将40只普通级日本大耳家兔随机分为细胞移植组和对照组各20只.实验组腹腔注射40％CCl4橄榄油溶液建立肝纤维化模型.对照组腹腔注射等量生理盐水.细胞移植组于模型稳定后自体髂骨处抽取骨髓,采用氯化氨红细胞溶解法分离得到单核细胞,以5溴-2脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记体外ABM-MNCs及鉴定;分离培养ABM-MNCs,将3×109个ABM-MNCs经肠系膜上静脉回输体内.对照组回输等量生理盐水.移植前、移植后3、7、14、21 d分别取肝组织固定,进行免疫组织化学检测.结果：BrdU体外标记ABM-MNCs的免疫组织化学表现示:20μmol／L BrdU孵育ABM-MNCs 72h的阳性标记率达95％;肝组织20μmol／L BrdU免疫组化染色切片显示:自体骨髓单核细胞移植后第3天,肝小叶中央静脉周围BrdU染色阳性,随着时间的推移.阳性染色逐渐增强,并逐步向肝组织内部延伸.阳性染色主要分布于肝组织汇管区周围组织.而对照组BrdU染色则阴性。结论：ABM-MNCs经肠系膜上静脉移植后,可在纤维化区及周边区存活,定植。
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