【摘 要】
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的保守基因序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,并对其进行了优化筛选;对荧光RT-PCR的反应条件进行优化,建立了PRRSV荧光RT-PCR检测方法。
【机 构】
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北京出入境检验检疫局 北京 101113
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的保守基因序列设计合成引物和TaqMan荧光探针,并对其进行了优化筛选;对荧光RT-PCR的反应条件进行优化,建立了PRRSV荧光RT-PCR检测方法。将PRRSV细胞培养物系列稀释后,用建立的荧光RT-PCR方法和常规RT-PCR同时进行检测。结果显示,所建立的TaqMan荧光RT-PCR方法检测下限可达1个TCID50,比常规RT-PCR灵敏度高100倍。用该方法对2005--2007年发病猪场采集的猪血清和多种组织样品进行了检测。结果,该方法与病毒分离检测方法的阳性符合率为100％。同时对建立的荧光RT-PCR进行重复性试验,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前PRRS的诊断需要。
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