为进一步研究ORF3蛋白抗原特性，本试验首先将ORF3全长插人pE载体进行表达，表达产物纯化后多次免疫BALE/e小鼠，采用经典单抗制备技术，制备ORF3蛋白单克隆抗体。同时将ORF3全长基因随机分为三段，上下游之间互有重叠，进行分段表达。应用western blotting试验方法，检测分段表达蛋白与单抗结合效果。试验结果表明，ORF3全长基因表达蛋白以可溶形式存在;获得的唯一一株单克隆抗体可在低浓度下与ORF3重组蛋白结合，而不与His标签反应。Western blotting结果表明，单克隆抗体仅与第三段ORF3截短蛋白相结合，序列分析显示，第三段截短蛋白为ORF3的C末端所在区域。综上所述，该研究成功获得猪HEV ORF3蛋白单克隆抗体，为进一步开展ORF3活性研究提供研究材料;同时再次表明ORF3的C末端存在重要的抗原决定簇位点，为今后进行猪HEV诊断方法的研究奠定试验基础。