一株大肠杆菌宽宿主谱噬菌体生物学特性的比较研究

来源 :中国生物化学与分子生物学会临床应用生物化学与分子生物学分会成立大会暨第一届临床应用生物化学与分子生物学学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wukai110032
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目的: 通过比较研究一株宿主谱发生突变的宽宿主范围噬菌体与其原始野生型单一宿主谱噬菌体株的生物学特性改变,探讨噬菌体识别特异性机制和将噬菌体作为生物消毒剂应用于环境污水净化的可行性. 方法: 利用大肠杆菌285菌株自环境污水中筛选到一株具有宽宿主范围的噬菌体;通过对这一宽宿主范围噬菌体与野生型噬菌体f2(噬菌体f2以大肠杆菌285株为专一宿主菌)在电镜超微形态、生长曲线、抗原特性、基因组成、环境样本中微生物的杀灭效应等方面的比较观察,分析宿主谱改变对噬菌体的生物学特性的影响. 结果: 通过对噬菌体f2及宽宿主范围噬菌体株(暂将其命名为噬菌体XY)的生物学特性观察发现,两噬菌体电镜下形态均为微球形且棱角不明显,但噬菌体XY颗粒偶见短尾,大小形态不均一,直径在20~90nm之间:噬菌体f2和噬菌体XY的抗血清K值分别为30.1和41.5:血清中和试验结果显示:噬菌体XY与噬菌体f2的相关度较低(K值比<0.45):一步生长实验结果显示:噬菌体XY较噬菌体f2具有吸附速率高、潜伏期短、裂解量大的特点;核酸分析试验显示:两噬菌体均为约6000 bp的单链RNA噬菌体,但宿主谱改变前后它们的RAPD-PCR及RT-PCR存在明显的差异;环境水样本微生物杀灭试验结果显示:噬菌体XY对环境水样本中的大肠杆菌杀灭率可达到36.75%~56.28%,而噬菌体f2则为19.19%~35.06%(P=0.000). 结论: 宽宿主谱噬菌体较大肠杆菌噬菌体f2在超微形态、一步生长曲线、抗原性等方面均存在差异:微生物杀灭效果也明显高于噬菌体f2(P=0.000):核酸分析证实其宿主特异性裂解效应已从基因水平发生了变化.
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