ANGPTL1在肿瘤细胞转移中的作用初探

来源 :第18次全国干扰素及细胞因子学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Colo
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ANGPTL1基因是ANGPTLs(血管生成素相关蛋白)家族的一个成员,它对血管发生、内皮细胞的保护及胚胎器官发生等方面有重要作用.为探究血管生成素相关蛋白1(ANGPTL1)在肿瘤转移进程中的作用机制,从人肝cDNA文库中经PCR扩增出ANGPLT1基因及其C端FD domain,经纯化、回收目的片段,将其插入克隆载体pcDNA3.1/His-Myc(-)B,构建ANGPTL1的过表达载体,转染肿瘤细胞,筛选阳性克隆,通过细胞划痕实验,粘附实验检测ANGPTL1对肿瘤细胞迁移能力的影响.进而通过pull down,CoIP结合质谱技术,以及激光共聚焦发现并验证ANGPTL1相互作用蛋白.在ANGPLT1过表达的肿瘤细胞株中,细胞的迁移能力减弱,粘附能力增强,提示ANGPLT1在介导细胞迁移和运动性中发挥重要作用。通过pull down寻找到与ANGPLT1相互作用蛋白MACF1(微管微丝交联因子),并通过免疫共沉淀结合质谱鉴定以及免疫荧光共聚焦技术验证了ANGPLT1与MACF1间的相互作用。进一步机制研究将深入探讨ANGPTL1与MACF1相互作用可能在Wnt通路传递以及肿瘤EMT进程中的重要作用。
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背景:细胞穿膜肽(Cell-penetrating peptides,CPPs)是一类可以携带生物大分子跨膜进入细胞的短肽,作为一种有效的胞内分子运载工具,有着广泛的应用前景.新近鉴定一种新型的人源性细胞穿膜肽(命名为hPP10),具有优于TAT的穿膜效率、安全性高等特点.KLA(KLAKLAKKLAKLAK)是一段能够破坏线粒体膜,导致线粒体释放细胞色素c,从而诱导细胞发生凋亡的短肽.KLA自身
背景:细胞穿膜肽(Cell-penetrating peptides,CPPs)是一类可以携带生物大分子跨膜进入细胞的短肽,作为一种有效的胞内分子运载工具,有着广泛的应用前景.新近鉴定一种新型的人源性细胞穿膜肽(命名为hPP10),具有优于TAT的穿膜效率、安全性高等特点.凋亡素(Apoptin)是鸡贫血病毒基因VP3编码的,由121个氨基酸组成的蛋白分子,可选择性诱导肿瘤细胞凋亡.目的:探讨新型