大黄鱼肌肉组织双向凝胶电泳技术的建立对于其品质的研究具有重要的意义，鉴于此，本研究旨在建立大黄鱼肌肉组织蛋白质的双向电泳体系。在大黄鱼肌肉组织全蛋白抽提的基础上，进行双向电泳凝胶电泳分离技术的建立。研究中对水化上样方式、等电聚焦程序、染色方式等进行了必要的优化。结果表明大黄鱼双向凝胶电泳优化条件为：样品采用主动水化方式，等电聚焦过程中使用缓慢升压模式，水化和聚焦均在20℃进行，凝胶染色方法采用银氨染色。此外，适当延长除盐时间，提高等电聚焦电压和功率能显著提高电泳图谱的质量。实验最终获得了较满意的双向凝胶电泳图谱，且具有较高的分辨率和重复性，结果显示成功建立了大黄鱼肌肉组织蛋白质双向凝胶电泳分离体系。研究结果可为大黄鱼品质调控奠定一定基础，此外，基于双向凝胶电泳技术的蛋白质组学研究方法可以延伸到其他鱼类。