论文部分内容阅读
目的:探讨视网膜下移植CX3CL1基因修饰的MSCs(CX3CL1-MSCs)对光损伤视网膜结构和功能的保护作用.方法: SD大鼠散瞳后持续暴露于(9500±500) Lux的白光24h.HE染色观察强光暴露对视网膜组织结构的影响,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)测定法检测视网膜细胞凋亡情况.将MSCs和CX3CL1-MSCs移植到光损伤大鼠视网膜下腔,比较其向视网膜内层迁移的能力,采用HE染色观察外核层厚度变化,闪光视网膜电图(F-ERG)和TUNEL法评估其对宿主视网膜的保护作用.ED-1抗体标记视网膜上活化的小胶质细胞.Western blot检测移植后宿主视网膜表达CNTF、BDNF、IL-1β、TNF-α的水平.免疫荧光定位视网膜上CNTF、BDNF的表达.结果:光损伤后视网膜外核层厚度较正常组变薄,凋亡细胞增多(t=8.009、8.753,P<0.05).视网膜下腔移植后,CX3CL1-MSCs向视网膜内层的迁移能力强于MSCs(t=3.674,P<0.05).与MSCs移植组、DMEM移植组相比,移植CX3CL1-MSCs对于延缓视网膜外核层变薄,抑制视网膜细胞凋亡,减少活化的视网膜小胶质细胞的数量,具有更好地作用.同时,F-ERG结果显示移植后1w、3w、6w,移植CX3CL1-MSCs能够更好地保护视网膜功能.移植后3w,CX3CL1-MSCs移植组视网膜CNTF、BDNF的蛋白表达量高于MSCs移植组和DMEM移植组(FCNTF=31.490,FBDNF=26.040,P<0.05),而IL-1β、TNF-α的蛋白表达量低于其他组(FIL-1β=62.730,FTNF-α=21.940,P<0.05).免疫荧光显示,CX3CL1-MSCs移植后CNTF、BDNF能够表达于视网膜全层和整合入视网膜的MSCs.结论:视网膜下腔移植CX3CL1-MSCs可强化对光损伤视网膜结构和功能的保护作用.