目前,兔出血症组织灭活疫苗生产面临着非免兔来源不足的问题,这严重地制约着疫苗的生产及养兔业的发展。我们通过分子生物学等技术构建了重组兔出血症病毒VP60杆状病毒(BAC-VP60株)。将该重组毒作为生产用毒种,以兔出血症病毒皖阜株作为检验用毒种,进行了兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗(BAC-VP60株)的研制。首先,我们对重组兔出血症病毒VP60杆状病毒(BAC-VP60株)、兔出血症病毒皖阜株以及生产用Sf9昆虫细胞进行了传代,并对它们进行了全面的鉴定和研究。结果显示,疫苗毒传代稳定、免疫原性良好;检验用毒种传代、毒力均稳定;生产用Sf9细胞传代稳定、无致瘤性。其次,通过生产工艺研究,确定了细胞的适用培养基、初始浓度、接毒剂量、收获时间以及培养方式。在以上研究基础上,实验室制备了5批次疫苗,并对疫苗产品的安全性、免疫效力、免疫期、保存期等进行了研究。结果显示,实验室产品对所有品种的家兔均安全;疫苗具有较好的免疫效力,免疫期(免疫持续期)可达7个月;产品在2~8℃保存,保存期至少为24个月。接下来,在疫苗生产企业进行中试生产,连续生产10批,共计约110万头份。使用6批中间试制产品在江苏、山东、浙江省内的6个规模化养兔场,对不同品种、不同日龄的家兔进行临床试验,通过疫苗注射后的临床观察、生产性能测定、攻毒保护等方法评估该疫苗的安全性及免疫效力。试验结果显示,该产品对不同品种、不同日龄的家兔均安全;在使用该疫苗期间,所有养殖场均未发生兔出血症疫情,实验结束后,将家兔取回实验室进行攻毒。结果显示,疫苗免疫7个月后,免疫家兔能抵抗强毒的攻击,达到100%的保护,对照兔至少死亡4只。临床试验结束后,我们递交了兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗(BAC-VP60株)新兽药注册申请材料。目前,该疫苗已通过初审。