【摘 要】
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6--磷酸甘露糖(M6P)可与的6-磷酸甘露糖受体相结合.作为溶酶体酶的分拣员和投送员,在溶酶体酶代谢过程中起着重要的作用.M6P可以与类胰岛素生长因子、潜在转化生长因子竞
【机 构】
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北京化工大学,生命科学与技术学院,100029
【出 处】
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2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会
论文部分内容阅读
6--磷酸甘露糖(M6P)可与的6-磷酸甘露糖受体相结合.作为溶酶体酶的分拣员和投送员,在溶酶体酶代谢过程中起着重要的作用.M6P可以与类胰岛素生长因子、潜在转化生长因子竞争性结合6-磷酸甘露糖受体,从而调节细胞生长,抑制β转化生长因子的形成.我们通过异源表达分枝杆菌(Mycobacterium sp) MCS菌株中的无机多聚磷酸盐依赖型葡萄糖/甘露糖激酶(MP),以此催化多聚磷酸盐与甘露糖合成6-磷酸甘露糖.通过研究发现MP的最适pH为8.5,最适温度为25℃,六偏磷酸盐为最适的磷酸供体,对葡萄糖的亲和性大于甘露糖,二价镁离子可以有效提高酶活.酶法合成6-磷酸甘露糖的最适摩尔比为甘露糖与六偏磷酸盐的摩尔比1∶3.50mM底物,在25℃,200rpm反应16h后,转化率达到90％.另外,我们也异源表达了节杆菌(Arthrobacter sp) KM菌株中无机多聚磷酸盐依赖型葡萄糖/甘露糖激酶(L7),且将其应用在6-磷酸甘露糖的合成中,通过对反应温度、pH、底物摩尔比的优化,50mM的底物,30℃,200rpm反应3h后,转化率可以达到100％.
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