仔猪小肠钠离子依赖性的氨基酸转运

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本文旨在利用Ussing Chamber技术研究哺乳仔猪空肠对六种氨基酸的钠离子依赖转运机制,探讨不同浓度氨基酸在空肠转运的差异和特点。选取16头16天哺乳仔猪,平均体重为3.26kg,液体代乳料饲喂2周。试验期末,于采食后2h屠宰,打开腹腔,取空肠中段约10cm,用预冷的Krebs-Henseleit缓冲液洗去肠内容物。迅速将空肠分为长度约lcm的6个肠段,分别安装在Ussing Chamber检测仪的6个通道上,小肠在灌流室中的暴露面积是0.5cm~2。分别检测小肠对不同浓度(0mmol/L.0.5mmol/L.1.0mmol/L,2.0mmol/L,5.0mmol/L)的羟脯氨酸(OH-Pro)、甘氨酸(Gly)、精氨酸(Arg)、苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)和谷氨酸(Glu)的空肠转运能力,记录短路电流值Isc。实验表明:(1)空肠初始短路电流Isc为25.8μA/cm~2。(2)不同氨基酸,不同浓度所引起的短路电流变化倍数=(某一浓度氨基酸引起的短路电流除以0mmol/L浓度时的短路电流)存在极显著差异(P<0.01)。其中Glu引起的短路电流变化倍数(0.5mmol/L,1.0mmol/L,2.0mmol/L,5.0mmol/L时分别为1.10,1.9,2.01,2.01)最大,其次为Thr(1.41,1.90,1.86,1.92)、Ser(1.38,1.55,1.68,1.70)、Gly(1.14,1.26,1.33,1.35)、OH-Pro(1.15,1.19,1.26,1.27)和Arg(1.09,1.21,1.29,1.29)。氨基酸转运能力可以反映肠道对氨基酸的吸收能力,另外,氨基酸的转运载体的离子依赖性会影响水分的吸收。(3)无氧条件下,Isc显著下降(p<0.01),处理10min,AIsc=(某一浓度氨基酸引起的短路电流减去0mmol/L浓度时的短路电流)为-12.53μA/cm~2;通入氧气后,Isc显著回升(P<0.01),△Isc为2.77μA/cm~2;继续通氧,Isc又显著下降,1 h后,△Isc为-27.25μA/cm~2。氨基酸转运是耗能的主动运输过程,缺氧就会造成供能不足,原发性的Na-K-ATP酶泵无法启动,Na~+耦联协同运输和反向转运都无法进行。从而引起氨基酸转运受阻,短路电流下降。氧气恢复会短期提高氨基酸转运,但由于充氧后引起的氧化应激和组织损伤,最终造成了肠道转运能力不可逆转的下降。综上所述,氨基酸的转运是耗能的主动运输过程;哺乳仔猪空肠对Glu的转运能力很强,其次为Thr、Ser和Gly,这些氨基酸的转运载体多为Na~+依赖性的,而OH-Pro和Arg的转运主要不是通过离子性依赖系统进行。
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