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目的:BCG对成人肺结核的预防效果不稳定,研制预防成人肺结核疫苗的思路主要侧重于卡介苗初免-亚单位疫苗/重组卡介苗增强免疫的策略。免疫佐剂是亚单位疫苗研究中的重要方向。CpG7909是近年发现的可用于人体的新型佐剂,具有较强的免疫刺激能力。本研究选取本课题组已证实具有较强免疫保护效果的ESAT6-Ag85A融合蛋白抗原作为亚单位疫苗,旨在探讨CpG7909免疫佐剂能否增强结核分枝杆菌亚单位疫苗的的免疫保护效果。
方法:将实验动物小鼠分为Cp7909G组和弗氏不完全佐剂对照组,以ESAT6-Ag85A融合蛋白(Pe685A)为亚单位疫苗,将CpG7909和弗氏不完全佐剂分别与Pe685A混合均匀后免疫小鼠,采用MTT,检测脾淋巴细胞增殖、ELISA检测血清特异性抗Pe685A抗体、FACS检测脾淋巴细胞CD4+与CD8+T细胞分型、RT PCR检测肺脏细胞因子水平。
结果:与弗氏不完全佐剂比较,CpG7909作为佐剂,与亚单位疫苗Pe685A免疫小鼠后,能刺激小鼠肺脏产生如IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-10和IL-12等细胞因子表达水平升高,增强脾淋巴细胞增殖,促进脾脏CD4+T淋巴细胞分化,诱导更强的Th1型细胞免疫的产生。
结论:CpG7909有望成为增强结核分枝杆菌亚单位疫苗免疫保护效果的新型免疫佐剂。
方法:将实验动物小鼠分为Cp7909G组和弗氏不完全佐剂对照组,以ESAT6-Ag85A融合蛋白(Pe685A)为亚单位疫苗,将CpG7909和弗氏不完全佐剂分别与Pe685A混合均匀后免疫小鼠,采用MTT,检测脾淋巴细胞增殖、ELISA检测血清特异性抗Pe685A抗体、FACS检测脾淋巴细胞CD4+与CD8+T细胞分型、RT PCR检测肺脏细胞因子水平。
结果:与弗氏不完全佐剂比较,CpG7909作为佐剂,与亚单位疫苗Pe685A免疫小鼠后,能刺激小鼠肺脏产生如IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-10和IL-12等细胞因子表达水平升高,增强脾淋巴细胞增殖,促进脾脏CD4+T淋巴细胞分化,诱导更强的Th1型细胞免疫的产生。
结论:CpG7909有望成为增强结核分枝杆菌亚单位疫苗免疫保护效果的新型免疫佐剂。