胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)单个核细胞输注对MRL/Ipr小鼠作用的实验研究

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hejiashuo
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目的:在减低剂量放射线预处理方案下,观察来源于C57BL/6孕鼠的FNPB单个核细胞对MRL/Ipr小鼠的治疗作用以及可能的机制.方法:20周龄MRL/Ipr小鼠被随机分成3组(n=15只/组):对照组小鼠不经任何治疗;放疗组小鼠仅行放射线治疗;移植组小鼠行放射线照射后给予FNPB治疗.分析各组小鼠死亡率、体重和脾脏指数改变情况,并采用ELISA法检测各组小鼠血清抗ds-DNA抗体、ANA、IL-17和TGF-β,采用苦味酸法检测小鼠血清肌酐,采用考马斯亮蓝法检测小鼠24h尿蛋白.采用流式细胞技术分析各组小鼠外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞和CD8+T细胞变化情况.对各组小鼠肾脏组织H.E染色并行显微镜病理检查.并采用原位杂交法检测MRL/Ipr小鼠肾内血管平滑肌细胞中的microRNA-145表达情况.结果:移植组在提高MRL/Ipr小鼠生存率,增加体重,减小脾脏指数,减少血清抗ds-DNA抗体、ANA和肌醉,减少24h尿蛋白及改善肾脏病理损害方面均明显优于对照组和放疗组。并且,移植组小鼠在造血重建(白细胞、红细胞和血小板恢复)也优于放疗组小鼠。流式细胞计数分析进一步表明,与对照组比较,在放疗组和移植组小鼠外周血Th1细胞、CD8+T细胞和Treg细胞均明显增加,同时伴随Th2细胞、CD4+T细胞和Th17细胞减少。免疫细胞化学法分析表明,与对照组比较,放疗组和移植组小鼠血清TGF-β明显增加,而血清IL-17明显减少。在MRL/Ipr小鼠中,其肾脏血管平滑肌细胞中存在microRNA-145的表达,但是在肾内血管的内膜和外膜中没有发现明显microRNA-145表达。与对照组和放疗组MRL/Ipr小鼠相比,microRNA-145在移植组MRL/Ipr小鼠肾脏血管平滑肌细胞中表达均明显增加;与对照组MRL/Ipr小鼠相比,在放疗组MRUIpr小鼠肾脏血管平滑肌细胞中表达稍增加。结论:非清髓放射线预处理后FNPB单个核细胞治疗对MRUIpr小鼠CD4+T细胞及其Th1/Th2,Th17/Treg平衡和其相应的细胞因子具有显著的调控作用,使其免疫进程得到控制和改善,从而对MRUIpr小鼠具有安全有效的治疗作用。并且,microRNA-145在MRL/Ipr小鼠肾脏血管平滑肌细胞中存在表达,并且FNPB单个核细胞治疗能够提高MRL/Ipr小鼠肾内血管平滑肌细胞中microRNA-145的表达。因此,非清髓非血缘FNP日治疗为临床脐血移植治疗SLE患者提供了动物试验证据及临床应用可能。
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