SPLUNC 1通过TLR4信号通路抑制炎症参与鼻咽癌发生的机制研究

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<正>目的:通过研究SPLUNC 1基因对鼻咽癌细胞系5-8F和6-1 0B受细菌脂多糖L P S刺激时细胞TLR4及其下游通路的影响,确定SPLUNC1、炎症与鼻咽癌发生发展的关系。方法:首先应用RT-PCR检测鼻咽癌细胞系(5-8F,6-10B,HNE1,HNE2,CNE1,CNE2,HK-1,C666-1)以及正常鼻咽上皮细胞系NP69中TLR4的表达水平。利用鼻咽组织芯片检测SPLUCNC 1与TLR4在组织芯片中的表达情况,绘制SPLUNC1与TLR4的相关性曲线。随后MTT检测不同浓度的LPS刺激鼻咽癌细胞株5-8F和6-1 0B,24h时观察LPS对细胞增殖的影响。接着将SPLUNC 1克隆入pCMV-GFP哺乳动物表达载体,稳定转染鼻咽癌5-8F和6-10B细胞株后,应用免疫荧光、荧光素酶报告系统以及蛋白质印迹检测LPS刺激0h,0.5h,1h,6h,12h,
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