【摘 要】
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目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUSCs)体外分离、培养方法,观察培养时间、转代次数与其生物活性的关系,为临床选择合适的HUSCs种子细胞提供参考依据。方法 选取健康婴儿脐带样本26份,男婴11例,女婴15例,无菌条件下去除表面羊膜及内部血管并反复冲洗,剥出华氏胶组织剪碎,经胶原酶和胰酶消化后过滤,离心、收集沉淀物,用含α-MEM、100 u/ml青霉素、100 u/ml链霉素、10％ FBS的无
【机 构】
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浙江大学医学院临床医学系,浙江杭州,310029 武警浙江总队嘉兴医院检验科,浙江嘉兴314000
【出 处】
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2015中国转化医学大会暨中国转化医学联盟成立大会
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目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUSCs)体外分离、培养方法,观察培养时间、转代次数与其生物活性的关系,为临床选择合适的HUSCs种子细胞提供参考依据。方法 选取健康婴儿脐带样本26份,男婴11例,女婴15例,无菌条件下去除表面羊膜及内部血管并反复冲洗,剥出华氏胶组织剪碎,经胶原酶和胰酶消化后过滤,离心、收集沉淀物,用含α-MEM、100 u/ml青霉素、100 u/ml链霉素、10％ FBS的无血清培养液重悬,置37℃、5％CO2饱和湿度培养箱中培养。采用密度梯度离心法结合贴壁筛选法分离纯化,传代培养、扩增HUSCs,行碘化丙啶荧光染色(PI),流式细胞仪检测表面标志CD34、CD109、CD29、CD44鉴定；倒置显微镜下计数细胞、观察形态及生长情况,分析培养时间、转代次数与细胞生物活性的关系。
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