【摘 要】
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目的：提高酵母工程菌中紫穗槐-4,11-二烯的产量。 方法：紫穗槐-4,11-二烯是抗疟药物青蒿素的中间体，由紫穗槐-4，11-二烯合酶催化FPP环化形成。通过连续重叠PCR的方法将透明颤
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院 (卫生部天然药物生物合成重点实验室、中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室),北京,100050
【出 处】
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2009年中国药学大会暨第九届中国药师周
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目的：提高酵母工程菌中紫穗槐-4,11-二烯的产量。
方法：紫穗槐-4,11-二烯是抗疟药物青蒿素的中间体，由紫穗槐-4，11-二烯合酶催化FPP环化形成。通过连续重叠PCR的方法将透明颤菌血红蛋白基因突变成用酵母偏爱密码子表示的序列Vgbm。构建了pYeDP60/GAPDH/Vgb和pYeDP60/GAPDH/Vgbm两个表达载体，将这两个表达载体分别导入紫穗槐-4,11-二烯酿酒酵母工程菌WK1中，得到两个酵母工程菌WK1[Vgb]和WK1[Vgbm]。以朱栾倍半萜为标准品，对WK1[Vgb]和WK1[Vgbm]发酵产物进行GC-MS定量检测。
结果：结果表明WK1，WK1[Vgb]和WK1[Vgbm]发酵产物均检测到了紫穗槐-4,11-二烯。而且WK1[Vgb]中紫穗槐-4,11-二烯的产量比WK1中的产量要高2倍，WK1[Vgbm]中紫穗槐-4,11-二烯的产量比WK1中的产量要高3倍。
结论：透明颤菌血红蛋白能够提高酵母工程菌紫穗槐-4,11-二烯的产量。
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