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目的 探讨一种在小鼠活体检测视网膜活性氧的方法.方法 C57B6J成年雌性小鼠分为实验组(5只)和假手术组(3只),实验组左眼视神经钳夹10秒致视网膜神经节细胞损伤模型,假手术组左眼仅作结膜切口、暴露视神经但不钳夹,所有小鼠右眼均作为正常对照组.分别于术后4小时、1天、3天、5天,采用特异性结合活性氧的L-012化学发光物小鼠腹腔注射,小鼠持续吸入麻醉后,采用小动物活体影像仪器IVIS检测L-012在小鼠眼部的发光量和时间.比较L-012三种剂量下(75mg/kg、 25mg/kg和7.5mg/kg)的眼部发光量,探讨L-012的最佳用量.采用活性氧抑制剂(Tempol和Apocynin)观察L-012在造模后1天小鼠眼部发光量的变化.ELISA定量分析造模后1天小鼠视网膜组织的氧化蛋白质含量.结果 右眼正常对照组在任何时间点均未检测到L-012发光信号.术后第1天实验组左眼(造模眼)L-012的发光量最高,高峰出现在腹腔注射L-012 (75mg/kg)后15-20分钟,发光峰值平均为(120±61) ×103 p/s/cm2/sr,假手术组发光峰值为(8±1)×103 p/s/cm2/sr.术后第3天实验组左眼发光量明显减少,而术后4小时及第5天发光量很低.L-012的腹腔注射最佳剂量为75mg/kg,并且经视网膜切片HE染色观察未发现L-012的组织毒性.采用活性氧抑制剂后,L-012在造模小鼠眼部的发光量显著降低.ELISA检测造模后第1天小鼠视网膜组织的羰基化氧化蛋白质含量为(1.36±0.16) nmol/mg protein,较正常对照组(0.51±0.05 nmol/mg)显著增高(p＜ 0.05).结论 我们可以利用L-012特异性结合活性氧并发光的特性,在活体、无创性、定量检测小鼠视网膜活性氧成分,视神经钳夹后的活性氧水平变化有助于我们认识外伤性视神经病变的病理机制.