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目的构建重组人肿瘤抑素(tumstatin)的分泌型真核表达载体。方法:以人胚肾293细胞为材料,提取总RNA,用RT- PCR方法合成人tumstatin cDNA,将该cDNA克隆到pGEM-T载体获得重组质粒pGEM-T/tumstatin。利用PCR从pGEM-T/ tumstatin和PBV220-TNF载体中分别扩增出sig-tumstatin-linker和linker-TNF片段.将其克隆得到sig-tumstatin-linker-TNF片段,sig-tumstatin-linker-TNF片段经酶切后,插入经同样酶切pIRESneo3的质粒利用克隆PCR、限制性内切酶消化以及序列测定对获得的sig-tumstatin-linker-TNF基因片段及重组载体进行验证。结果:所获得的sig-tumstatin-linker-TNF片段(1.32 kb)序列与报道的序列完全一致。酶切鉴定的结果表明含肿瘤抑素基因的重组pIRESneo3/sig-tumstatin-linker-TNF分泌型真核表达载体构建成功。结论:成功地构建了重组人肿瘤抑素融合基因分泌型真核表达载体,为开展下一步的实验奠定了基础。