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目的：通过体外培养人结肠癌SW620细胞,利用分子生物学实验技术,探讨δ-生育三烯酚诱导人结肠癌SW620细胞程序化死亡的机制.
方法：体外培养SW620细胞,加入不同剂量δ-生育三烯酚(1、2.5、5、10、15、20、25、30和40μmol/L)和乙醇(溶剂对照)作用24 h后,以MTT实验观察&-生育三烯酚对SW620细胞存活率的影响;然后按照5、10、15、20μmol/Lδ-生育三烯酚作用于细胞,以荧光染色(AO/EB染色,DAPI染色)、电镜超微结构观察、流式细胞术、Caspase-3活性测定等方法检测细胞的死亡情况,并比较加入z.VAD.fmk与否时细胞的存活率.
结果：δ-生育三烯酚分别作用24 h后,与乙醇对照组相比,各剂量组δ-生育三烯酚均可以使SW620细胞存活率降低(P＜0.05),且细胞存活率分别随着δ-生育三烯酚剂量的增加呈现降低的趋势.δ-生育三烯酚对SW620细胞的IC50值为15.18μmol/L.通过细胞形态学观察发现,δ-生育三烯酚分别作用SW620细胞6h和24 h后,细胞内未见细胞核不规整,膜泡化,核染色体DNA浓缩、着边呈新月状,凋亡小体形成等典型的凋亡现象,取而代之的是细胞内出现大量空泡.电镜结果显示线粒体发生了肿胀及空泡变.Caspase抑制剂z.VAD.fmk加入后,SW620细胞生存率仍随着δ-生育三烯酚的剂量增加而呈现下降的趋势(P＜0.05),相同剂量组间细胞生存率的差异不具有统计学意义(P＞0.05);δ-生育三烯酚分别作用SW620细胞6和24 h后,处理组细胞凋亡率与对照组比较,差异没有统计学意义(P＞0.105);δ-生育三烯酚作用SW620细胞24 h后,随作用剂量的增加,Caspase-3活性并未增强(P＞0.05).
结论：δ-生育三烯酚抑制SW620细胞增殖,且可以诱导SW620细胞产生paraptosis样死亡.